| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 114-1 | ||||
Resumo:O líquen é uma complexa comunidade microbiana resultante da associação simbiótica entre fungos (micobionte) e microalgas e/ou cianobactérias (fotobionte). Sua classificação é tradicionalmente definida a partir da sua apresentação macroscópica podendo ser crostoso, folioso, fruticoso e gelatinoso e a depender de seu substrato de fixação: saxícolas, corticícolas e terrícolas. Aproximadamente 20% das espécies de fungos conhecidas fazem parte da comunidade liquênica e menos de 2% dos fotobiontes são estudados. Com isso, este trabalho teve como objetivo realizar um estudo das espécies de líquens no município de São Luís e padronizar o cultivo e isolamento dos fotobiontes. As coletas foram realizadas em outubro de 2020 e em maio de 2023 em 3 pontos do Campus do Bacanga da UFMA, sendo dois pontos de áreas antropizadas e um ponto de floresta preservada. As coletas foram realizadas de modo aleatório em substratos de arbustos, árvores e rochas. Obteve-se um total de 53 espécimes. Em laboratório as amostras foram lavadas com água destilada, secas a temperatura ambiente e divididas em 3 alíquotas, sendo uma para identificação taxonômica, uma para cultivo em meio BG11 e uma congelada a -20 o C para posterior extração do DNA. O isolamento foi realizado com a técnica descrita por YAMAMOTO et. al (1985) das amostras cujo fotobionte apresentou crescimento em cultivo em meio BG11, incubados em estufa a 28 °C e fotoperíodo de 12h. O DNA foi extraído utilizando o kit PowerPlant e amplificado por PCR utilizando os marcadores ITS, RbcL, 16S e 18S rRNA; posteriormente foram purificadas através do Purelink Quick Gel Extracion Kit. As sequências obtidas foram enviadas para um serviço de sequenciamento de DNA pelo método Sanger e a qualidade avaliada no programa BioEdit. Em seguida foram comparadas ao banco de dados do GenBank utilizando a ferramenta BLASTN. Do total de 53 espécimes coletadas, 4 amostras foram utilizadas para padronização e caracterização, sendo elas: P5A1 (cianobionte), P3A1, P3A2 e P4 (clorobionte). A cianobactéria isolada apresenta estrutura filamentosa ramificada e heterocitada, já as clorófitas apresentam forma unicelular e esférica. A cepa P5A1 foi identificada como Nostocales e as demais pertencentes a ordem Trebouxiales. O sequenciamento de 17 amostras indicou taxa considerável de variação de gênero, sendo Coelastrella, Tetradesmus e Tetraselmis como gêneros de clorófitas e Anabaena, Brasilonema e Nostoc para gêneros de cianobactérias. Portanto, o campus da UFMA (São Luís) possui uma grande diversidade pouco explorada de líquens. A baixa variação morfológica é um indicador de que o local está com baixa qualidade ambiental. A metodologia utilizada para o isolamento e cultivo dos fotobiontes se mostrou eficaz tornando possível a identificação morfológica dos fotobiontes descritos. Os resultados quantificam a diversidade de líquens na ilha de São Luís e seu potencial como bioindicadores e futuramente embasar trabalhos de avaliação do seu potencial biotecnológico. Palavras-chave: Biomonitoramento, Cianobiontes, Liquens, Nostocales Agência de fomento:Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA) e Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)/Programa de Desenvolvimento da Pós-Graduação (PDPG) | |||||